Антитела к двуспиральной ДНК IgG, тест 2-го поколения (Анти-дсДНК-NcX/Antibody to double-stranded DNA, Anti-dsDNA, Anti-dsDNA-NcX) в Екатеринбурге

Антитела к двуспиральной ДНК (дсДНК) реагируют с фосфорибозным скелетом молекул эукариотической ДНК. Связывание антител с ДНК не зависит от ее конформации и нуклеотидной последовательности. In vivo основной мишенью антител к дсДНК являются фрагменты ДНК образующейся в ходе апоптоза эпителиальных клеток и лимфоцитов. Большие количества дсДНК, ассоциированной с нуклеосомами, образуются при системной красной волчанки (СКВ) и могут быть обнаружены в периферической крови пациентов. Именно дсДНК, ассоциированная с нуклеосомами (дсДНК-NcX), является основным антигеном антинуклеарных антител при системной красной волчанке и принимает участие в поражении почек при этом заболевании. Титры антител к дсДНК тесно коррелируют с концентрацией IgG-содержащих иммунными комплексами в сыворотке крови больных СКВ. Исследования элюатов из почечных клубочков больных СКВ, указывают на большую концентрацию антител к дсДНК в элюате по сравнению с их концентрацией в сыворотке. В ходе развития волчаночного нефрита фрагменты ДНК и нуклеосомы связываются с базальной мембраной почек. Реакция между антителами к дсДНК со своим антигеном приводит к формированию иммунных комплексов insitu, которые нарушают функции подоцитов, базальной мембраны и приводят к иммунокомплексному повреждению клубочка с выраженной активацией комплемента и потреблением сывороточных факторов С3 и С4.

Антитела к дсДНК (нативной) перекрестно реагируют с осДНК (денатурированной), что затрудняет интерпретацию результатов теста, если в качестве антигена выступает дсДНК, загрязненной осДНК. Низкоспецифичные антитела осДНК, встречающиеся при различных аутоиммунных и инфекционных заболеваниях, инфекцию ДНК содержащими вирусами, например вирусом гриппа, ревматоидный артрит, хронический активный гепатит и инфекционный мононуклеоз, распознают денатурированные одноцепочечные фрагменты дсДНК. При использовании тест систем первого поколения для выявления антител к ДНК (нативной ДНК) нередко отмечаются неспецифические реакции с односпиральной ДНК. Неспецифические реакции в значительной мере обесценивают значение обследования пациентов, поскольку приводят к ложно-положительным результатам выявления антител к ДНК и ошибочной постановке диагноза системной красной волчанки.

Преимущества метода:

При использовании тест систем первого поколения для выявления антител к ДНК (нативной ДНК) нередко отмечаются неспецифические реакции с односпиральной ДНК. Неспецифические реакции в значительной мере обесценивают значение обследования пациентов, поскольку приводят к ложноположительным результатам выявления антител к ДНК и ошибочной постановке диагноза системной красной волчанки.

Для обеспечения высокой специфичности обследования в нашей лаборатории используется тест второго поколения. Использование более совершенной технологии позволяет исключить перекрестную реакцию антител с односпиральной ДНК. Использование положительно-заряженных гистоновых белков нуклеосом для сенсибилизации ИФА планшетов обеспечивает сохранение нативной структуры молекулы ДНК. Тесты второго поколения для выявления дсДНК в комплексе с нуклеосомами обеспечивают чувствительность более 60% при специфичности 95-98%.

При системной красной волчанке антитела к дсДНК могут быть обнаружены у 50-70% больных, и характеризуются гомогенным типом свечения ядра НЕр-2 клеток при выявлении АНФ. Антитела к дсДНК входят в состав 10-го критерия СКВ Американского Колледжа Ревматологов, совместно с обнаружением антител к Sm антигену и определением антител к кардиолипину.