Антинуклеарные антитела, иммуноблот (аутоантитела класса IgG к 14 различным антигенам: nRNP/Sm, Sm, SS-A (SS-A нативный и Ro-52), SS-B, Scl-70, Jo-1, PM-Scl, протеин B центромера, PCNA, dsDNA, нуклеосомы, гистоны, рибосомальный белок P, AMA-M2)

Антинуклеарные антитела, иммуноблот — показатель аутоиммунных заболеваний соединительной ткани.

При иммуноблоте определяются следующие антитела, являющиеся основными маркёрами аутоиммунных заболеваний соединительной ткани: 

• Аутоантитела IgG к антигену nRNP/Sm;
• Аутоантитела IgG к антигену Sm;
• Аутоантитела IgG к антигену SS-A (60 kДа);
• Аутоантитела IgG к антигену SS-A (52 kДа);
• Аутоантитела IgG к антигену SS-B;
• Аутоантитела IgG к антигену Scl-70;
• Аутоантитела IgG к антигену PM-Scl;
• Аутоантитела IgG к антигену CENT B;
• Аутоантитела IgG к антигену Jo-1;
• Аутоантитела IgG к антигену ANA-PCNA;
• Аутоантитела IgG к антигену dsDNA;
• Аутоантитела IgG к нуклеосомам;
• Аутоантитела IgG к гистонам;
• Аутоантитела IgG к рибосомальному белку P;
• Аутоантитела IgG к AMA-M2.

Антинуклерные антитела
Антинуклерные антитела представляют семейство аутоантител, связывающихся с рибонуклеиновыми кислотами и ассоциированными с ними белками. Они встречаются более чем у 90% больных с диффузными болезнями соединительной ткани, а также часто отмечаются при аутоиммунных заболеваниях печени и ряде других состояний. На сегодняшний день охарактеризованы около 200 разновидностей этого семейства аутоантител, но не все они могут быть использованы в клинической практике.

Иммуноблот антинуклеарных антител
Иммуноблот антинуклеарных антител позволяет в одном тесте одновременно провести исследование 15 основных разновидностей антинуклеарных антител, что обеспечивает проведение дифференциальной диагностики основных системных ревматических заболеваний. Каждая разновидность аутоантител, выявляемая с помощью иммуноблота, обычно отмечается у пациентов с характерной клинической картиной, поэтому спектр аутоантител позволяет не только диагностировать заболевание, но и установить риск развития определенных клинических проявлений.

Иммуноблот антинуклеарных антител необходимо использовать на втором этапе серологического обследования при положительном результате других тестов, указывающих на присутствие в сыворотке обследуемого антинуклеарных антител.

Метод иммуноблота антинуклеарных антител в диагностике системных ревматических заболеваний характеризуется высокой клинической специфичностью. Отрицательный результат иммуноблота в этом случае не исключает диагноза системных ревматических заболеваний.

Основные заболевания, связанные с выявлением антинуклеарных антител (антигены выявляемые при иммуноблоте) :

• Sm (Smith). Специфический маркёр системной красной волчанки (входит в 10-й критерий СКВ Американского колледжа ревматологов, АСR);
• SS-A (Ro52). Отмечается при различных аутоиммунных заболеваниях, чаще при системной красной волчанке и ее кожных формах, системных ревматических заболеваниях, ревматоидном артрите, аутоиммунных заболеваниях печени и т.д.;
• SS-A (Ro60). Системная красная волчанка, кожные формы красной волчанки, фоточувствительность при системной красной волчанке, высокий риск врожденной красной волчанки и поражения сердца плода. Основной серологический показатель при синдроме Шегрена. Нередко отмечается совместно с антителами к SS-A (Ro52) антигену;
• SS-B. Синдром Шегрена, системная красная волчанка;
• PCNA. Системная красная волчанка, риск волчаночного нефрита;
• Рибосомы (Ribo P). Системная красная волчанка, риск поражения центральной нервной системы.
• Нуклеосомы. Системная красная волчанка, высокий риск волчаночного гломерулонефрита;
• Двуспиральная. ДНК Специфический маркер системной красной волчанки (входит в 10-й критерий СКВ ACR), высокий риск волчаночного нефрита;
• snRNP/Sm Смешанное заболевание соединительной ткани, системная красная волчанка с низким риском поражения почек, склеродермия;
• Гистоны. Системная красная волчанка, лекарственная волчанка, склеродермия;
• Scl-70. Системный склероз с диффузным поражением кожи и внутренних органов;
• PM-Scl. Cклеродермия, сопровождающаяся полимиозитом;
• CENР-B. CREST-синдром со склеродактилией, телангиэктазиями, подкожными кальцинатами, синдромом Рейно, эзофагитом;
• Jo-1. Полимиозит в виде антисинтетазного синдрома;
• AMA-M2. Первичный билиарный цирроз, синдром Шегрена.

Показания
Тест показан для диагностики и дифференциальной диагностики следующих состояний:

• системная красная волчанка; 
• подострая кожная волчанка и другие разновидности кожной волчанки;
• смешанное заболевание соединительной ткани;
• синдром Шегрена и ассоциированные заболевания;
• диффузная и локализованная склеродермия, CREST-синдром;
• воспалительные миопатии (полимиозит и дерматомиозит);
• ювенильный хронический артрит;
• аутоиммунный гепатит;
• первичный билиарный цирроз и склерозирующий холангит;
• использование данного теста показано при обнаружении высоких титров антинуклеарного фактора, антинуклеарных антител, антител к экстрагируемому ядерному антигену, антител к ДНК, антител к нуклеосомам и антифосфолипидных антител.

Подготовка


Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак или спустя 4–6 часов после последнего приема пищи. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.

Интерпретация результатов
Единицы измерения: качественный тест, результат представляют в форме «обнаружено» или «не обнаружено».

При обнаружении полосы, характеризующей наличие какого-либо вида антител, интенсивность окраски полосы дополнительно описывают количеством плюсов («крестов») для каждого из выявленных видов антител. Увеличение степени позитивности косвенно отражает содержание и аффинность аутоантител.

Референсные значения: антитела к Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kДа), SS-A (52 кДа), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENР-B, dsDNA, Histone, Nucleosome, Rib P, AMA-M2, Jo-1 не обнаружены.

Результат определения аутоантител представляется в «крестах» для каждого соответствующего антигена. Увеличение степени серопозитивности косвенно отражает содержание и аффинность аутоантител.

Варианты результата оценки серопозитивности приведены ниже:

• отрицательный — антитела к соответствующим белкам не обнаружены;
• «+» — сомнительный (низкое содержание аутоантител к специфическому антигену);
• «++» — положительный (среднее содержание аутоантител к специфическому антигену);
• «+++» — сильноположительный (высокое содержание аутоантител к специфическому антигену). Часты случаи обнаружения в одном биоматериале нескольких специфичностей антинуклеарных антител.